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雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)【miRNA對(duì)靶基因調(diào)控研究】
miRNA通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式識(shí)別靶基因的3’UTR區(qū)，并根據(jù)互補(bǔ)程度的不同指導(dǎo)沉默復(fù)合體降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。因此，可以將目的基因的3’UTR區(qū)域構(gòu)建到含luciferase的報(bào)告基因上，通過(guò)比較miRNA過(guò)表達(dá)或inhibitor 與報(bào)告基因作用檢測(cè)熒光值的變化，判斷miRNA對(duì)靶基因的作用。再通過(guò)對(duì)3’ UTR區(qū)進(jìn)行定點(diǎn)突變的方法進(jìn)一步確定miRNA與靶基因3’UTR的作用位點(diǎn)。miRNA對(duì)靶基因功能的調(diào)控是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。通過(guò)利用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)尋找或驗(yàn)證miRNA對(duì)靶基因的調(diào)控作用是當(dāng)前最常用的技術(shù)。
作用示意圖
服務(wù)簡(jiǎn)介
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